熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統稱,其中最有代表性的是來自北美螢火蟲(Photinus pyralis)體內的熒光素酶。螢火蟲熒光素酶屬于加氧酶(oxygenase),其發光反應需要O2和Mg2+參與;有輔酶A(CoA)存在時能提高反應效率,增加發光時間。螢火蟲熒光素酶無需翻譯后修飾,即可表現出熒光素酶活性。本產品將螢火蟲熒光素酶的基因插入慢病毒介導的載體中,通過CAG啟動子過表達從而作為報告基因,在細胞中表達。常用于細胞標記后小動物細胞移植活體成像追蹤,從而評估移植后細胞的歸巢以及治療效果等。
主要特色:1、慢病圖載體系統介導;
2、標記的信號永遠不會丟失;
3、適合于細胞移植后小動物活體追蹤;
注意事項
螢光素酶標記液避免反復凍融,操作時要戴手套和口罩。該產品僅限于非臨床性科研使用。
操作步驟
細胞傳代培養到6孔板或者6cm盤中12-16小時后,將螢光素酶標記液0.3ml(6孔板)或者0.5ml(6cm盤)分別與新鮮細胞培養液混勻,比例為0.3ml螢光素酶標記液中加入0.7ml新鮮培養液和1.0μl polybrene(終濃度8ng/ml),0.5ml螢光素酶標記液中加入1.5ml新鮮培養液和2μl polybrean(終濃度8ng/ml)。預混好的螢光素酶標記液加入到目的細胞培養皿中,此時細胞密度不宜超過60%。2個小時之內每間隔15-30min輕輕晃動被標記的細胞培養皿,可以達到更好的標記效果,2小時之后培養皿中補充等體積的新鮮培養液,過夜培養后更換成新鮮培養液。48h之后,利用Progema公司生產的螢光素酶檢測試劑盒檢測標記效果。
試劑盒組份
組份 |
Cat: |
儲存條件 |
螢光素酶標記液 |
1 ml |
4 ℃ |
polybrene |
8 μg/ml |
4℃ |